Aksi itu berlaku di England, pada akhir tahun 1586 - awal tahun 1587. Ibu tirinya Mary Stuart, yang berhasrat untuk takhta Inggeris, dipenjarakan di istana Fotringay atas perintah Ratu Elizabeth. Jururawatnya Anna Kennedy ada bersamanya. Walaupun menghadapi penahanan dan banyak kesulitan, Mary tetap bersikeras. Dia berulang kali berjaya menyuap keselamatan dan mengatur konspirasi terhadap Elizabeth.
Penjaga terakhirnya, Flying, sangat tegas terhadapnya. Tetapi baru-baru ini, keponakannya Mortimer muncul di Fotringey, kembali dari pengembaraan di Perancis dan Itali, di mana dia masuk agama Katolik. Di sana dia menjadi penyokong Mary dan sekarang tiba di England untuk membebaskannya. Di sisinya terdapat dua belas pahlawan yang boleh dipercayai yang bersetuju untuk membantu. Mortimer melaporkan bahawa Mary telah diadili di London dan dihukum mati. Ratu memberi amaran kepada pemuda itu bahawa sekiranya berlaku kegagalan melarikan diri, kematian menantinya. Mortimer bersikeras ingin membebaskan Lady Stuart. Menyerahkan kepadanya, Maria menulis sepucuk surat kepada Count Leicester di London, dia berharap agar dia dapat menolong Mortimer dan dia.
Di Istana Westminster di istana Ratu, mereka membincangkan perkahwinan Elizabeth yang akan datang dengan Duke of Anjou. Ratu sendiri enggan bersetuju untuk perkahwinan ini. Dia terpaksa memikirkan keinginan anak buahnya untuk memiliki pewaris takhta yang sah. Tetapi sekarang pemikiran Elizabeth sibuk dengan pemikiran lain - dia harus menyetujui keputusan mahkamah terhadap Maria, adik perempuannya. Sebilangan besar bangsawan dari persekitaran Ratu England, yang dipimpin oleh Lord Burley, menyokong keputusan itu. Hanya Earl of Shrewsbury yang lama mewakili Lady Stuart, dengan malu-malu menyokongnya dan Earl of Leicester.
Terbang dengan anak saudaranya muncul di istana. Penerbangan itu memberi surat Elizabeth kepada tahanan yang meminta pertemuan peribadi. Ketika permaisuri membaca surat itu, air mata muncul di matanya, orang-orang di sekitarnya siap memahaminya sebagai tanda belas kasihan untuk adiknya. Sebenarnya, permaisuri Inggeris meminta Mortimer secara diam-diam membunuh pesaingnya, tetapi agar tidak ada yang menduga bahawa pukulan itu ditangani oleh tangan kerajaan. Keponakan Penerbangan setuju, kerana dia menyedari bahawa hanya dengan tipu daya dia dapat menangkis masalah dari Lady Stuart.
Ditinggalkan sendirian dengan Earl of Leicester, Mortimer memberinya surat kepada Mary. Ternyata penghitungan itu menjadi kegemaran Ratu Elizabeth selama sepuluh tahun, kini perkahwinannya dengan Duke Perancis yang muda dan tampan memusnahkan harapannya bukan hanya di tangannya, tetapi juga di hatinya. Surat Lady Stuart sekali lagi mengilhami dia dengan harapan akan takhta kerajaan. Sekiranya dia membantunya untuk membebaskan dirinya, maka dia menjanjikan tangannya kepadanya. Tetapi Leister licik dan sangat berhati-hati, dia meminta Mortimer untuk tidak pernah menyebut namanya dalam perbualan walaupun dengan orang-orangnya yang berpikiran sama.
Hitungan itu mengusulkan untuk mengatur pertemuan antara Elizabeth dan Mary, maka, dia yakin, pelaksanaannya akan dibatalkan, dan kita dapat membincangkannya nanti. Kebijaksanaan seperti itu tidak sesuai dengan pemuda itu; dia meminta Leicester untuk memikat Ratu England ke salah satu istana dan membuatnya terkurung di sana sehingga dia memerintahkan untuk membebaskan Mary. Kiraannya tidak dapat dilakukan.
Leicester melaksanakan rancangannya. Berkencan dengan Elizabeth, dia berjaya memujuknya, ketika berburu, untuk berpaling ke penjara istana Maria dan menemuinya tanpa diduga semasa berjalan di taman. Ratu bersetuju dengan cadangan "boros" kekasihnya.
Maria yang tidak curiga bersukacita dengan izin untuk berjalan-jalan di taman, tetapi Polet memaklumkan bahawa di sini dia akan bertemu dengan Elizabeth. Pada minit pertama pertemuan, seorang tahanan yang cantik bergegas di kaki adiknya yang dimahkotai dengan permintaan untuk membatalkan hukuman mati dan membebaskannya, tetapi Elizabeth berusaha untuk mempermalukan Lady Stuart, mengingatkannya akan kehidupan pribadinya yang gagal. Tidak dapat mengatasi kebanggaan gila dan kehilangan kawalan dirinya, Maria mengingatkan kakaknya bahawa dia adalah anak yang tidak sah, dan bukan warisnya yang sah. Elizabeth yang marah cepat-cepat pergi.
Maria memahami bahawa dia merosakkan harapan keselamatannya dengan tangannya sendiri, tetapi Mortimer, yang datang, melaporkan bahawa malam ini dia dan orang-orangnya akan menangkap Fotringay secara paksa dan membebaskannya. Atas keberaniannya, pemuda itu mengharapkan untuk menerima hadiah - cinta Mary, tetapi dia menolaknya.
Taman di sekitar istana dipenuhi dengan orang bersenjata. Rakan Mortimer membawa berita bahawa salah seorang penyokong mereka, sami Toulon, mencuba pembunuhan Elizabeth, tetapi kerisnya hanya menembusi mantel. Rencana itu terungkap, askar Ratu England sudah ada di sini dan mereka mesti segera melarikan diri, tetapi Mortimer dibutakan oleh hasratnya terhadap Mary, dia tetap membebaskannya atau mati bersamanya.
Setelah percubaan yang tidak berjaya dalam kehidupan Elizabeth, kerana pembunuh itu ternyata adalah warganegara Perancis, duta besar Perancis itu diusir segera dari England, sementara perjanjian perkahwinan itu dipecahkan. Burley menuduh Leister niat jahat, kerana dialah yang memikat Elizabeth untuk bertemu dengan Lady Stuart. Mortimer datang ke halaman, dia memberitahu Leicester bahawa semasa pencarian Mary, draf salinan suratnya kepada Count dijumpai. Tuan licik memerintahkan Mortimer untuk ditangkap, menyedari bahawa jika dia melaporkan bahawa dia telah mendedahkan konspirasi terhadap Elizabeth, dia akan dipertimbangkan ketika menjawab surat Maria kepadanya. Tetapi pemuda itu tidak diberikan ke tangan pegawai dan akhirnya menikam dirinya sendiri.
Pada penonton bersama Elizabeth Burley menunjukkan sepucuk surat kepada Mary Stuart kepada Earl of Leicester. Ratu yang terhina siap untuk mengesahkan hukuman mati bagi wanita yang tidak baik itu, tetapi Leister menerobos masuk ke kamarnya dengan paksa. Dia melaporkan bahawa bhikkhu yang ditangkap setelah percubaan pembunuhan itu hanyalah kaitan dalam rantai konspirasi, yang tujuannya adalah untuk membebaskan Lady Stewart dan mengangkatnya ke takhta. Memang, dia berhubungan dengan tahanan itu, tetapi di pihaknya hanya permainan untuk mengawasi apa yang sedang terjadi dan melindungi rajanya pada waktunya. Dia baru saja merampas pemula konspirasi - Sir Mortimer, tetapi dia berjaya menikam dirinya sendiri. Elizabeth yang megah siap mempercayai kekasihnya sekiranya dia sendiri akan menjatuhkan hukuman mati terhadap Mary.
Orang-orang yang marah di bawah tingkap istana kerajaan memerlukan hukuman mati bagi Lady Stuart. Setelah merenung, Elizabeth tetap menandatangani keputusan mahkamah mengenai pelaksanaannya dan menyerahkannya kepada setiausahanya. Akhbar itu mengatakan bahawa ratu Skotlandia harus dihukum mati pada waktu subuh. Setiausaha ragu-ragu untuk memberikan dokumen ini untuk segera menjatuhkan hukuman, tetapi Lord Burley, yang berada di ruang penerimaan Ratu, merobek kertas itu dari tangannya.
Perancah sedang dibina di halaman Istana Fotringay, dan di istana itu sendiri Maria mengucapkan selamat tinggal kepada orang yang dekat dengannya. Lady Stuart tenang, hanya secara tertutup dengan pelayannya Melville, dia mengakui bahawa keinginannya yang paling dalam adalah berkomunikasi dengan pengaku Katolik. Lelaki tua itu menyatakan kepadanya bahawa dia telah mengambil maruah dan sekarang bersedia untuk memaafkan semua dosanya. Permintaan terakhir Mary adalah bahawa setelah kematiannya semuanya dipenuhi dengan tepat mengikut kehendaknya. Dia meminta hatinya dihantar ke Perancis dan dikebumikan di sana. Count Leicester muncul, dia datang untuk memenuhi perintah Elizabeth - untuk mengantar Mary ke tempat hukuman mati.
Pada masa ini, di istana kerajaan, Elizabeth sedang menunggu berita dari Fotringey. Seorang Earl of Shrewsbury yang lama menghampirinya, yang melaporkan bahawa ahli-ahli Taurat Mary, yang di mahkamah menunjukkan rasa bersalah perempuan simpanan mereka dalam percubaan pembunuhan takhta Inggeris, menolak kata-kata mereka dan mengaku memfitnah Lady Stuart. Elizabeth dengan pura-pura menggambarkan pertobatannya dalam tandatangannya dengan keputusan mahkamah dan menyalahkan semua setiausaha yang lambat. Lord Burley masuk. Mary Stuart dihukum mati. Elizabeth menuduhnya tergesa-gesa untuk menjatuhkan hukuman. Lord Shrewsbury mengumumkan keputusannya untuk meninggalkan halaman. Count Leicester pergi sejurus selepas hukuman mati di Mary.